서장금(徐長今)(8세~49세) - 이영애

지성미를 갖춘 총명한 여인으로 적극적인 성격. 온갖 어 려움을 겪지만 강인한 의지로 끝내 이겨낸다. 모종의 사건 때문에 백정마을에서 숨어사는 부모 밑에서 어린 시절을 보내던 중, 갑자사화(甲子士禍)로 아버지와 헤어지고 어머니와 사별(死別)한다. 10살에 입궁하여 궁중최고의 요리사가 되고자 심혈을 기울여 능력을 인정받는다. 그러나 한상궁과 관련된 모함에 빠져 궁에서 쫓겨나 관비(官婢)가 된다. 관비로 있으면서 의술을 배워 다시 입궁, 최고의 의녀(醫女)가 되어 조선조 역사상 처음으로 임금의 주치의(主治醫)가 된다.

민정호(閔政浩) (29세~50세) - 지진희

한성부 판관(判官)으로 근무하던 중, 금계(金鷄) 구입건으 로 장금을 도와주다가 그로 인해 죽을 고비를 겪는다. 문과에 급제한 선비 출신임에도 무술이 뛰어나 잠시 내금 위(內禁衛)에서 근무한다. 수려한 용모에 학식이 깊다. 일찍 부인을 여의고 외로움에 숙직을 자청하다가 장금과 가까워 진다. 장금의 총명함과 학문에 대한 열정에 감복, 그녀를 도와주는 과정에서 그녀를 사랑하게 되며 그로 인해 여러 번 위기에 처한다.

최금영(崔今英)(20세~40세) - 홍리나

장금과 함께 궁에 들어와 오랜기간 같이 지낸다. 야심이 크고 출세욕이 강하며 미모를 바탕으로 오만하다. 최상궁의 조카. 신분의 차이에도 불구하고 최씨집안의 외 가쪽 적손(嫡孫)인 민정호를 어려서부터 흠모하고 짝사랑 한다. 장금과 함께 궁중최고의 요리사가 되기 위해 혼신 을 다하는 등 늘 장금을 경계하며 끝까지 장금과 경쟁관계가 된다

중종(中宗)(20대~60대) - 임호

조선조 제11대 임금. 온화하나 우유부단한 성격. 개혁정치를 펴다가 장금(長今)을 만나며 그녀의 따뜻한 성 품과 뛰어난 재주를 아낀다. 후에 그녀를 주치의가 아닌 여자로 사랑한다.